组织培养瓶(组织培养育苗时环境条件怎样调控)
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2023-11-30
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1. 组织培养瓶,组织培养育苗时环境条件怎样调控?
【花卉组织培养育苗环境条件的调控措施】花卉组织培养育苗环境条件的调控措施主要有温度、关照、湿度及气体四大方面,在进行组织培养育苗时,需重点关注这四点。下面是详细介绍,一起来看看吧!
一、温度
(1)培养原产热带的植物温度需肯控制在26-27度范围内,在冷凉地区植物温度需肯控制在20-23度,温度一般控制在23-27度能适应绝大多数的植物生长。
(2)夜间比白天低几度,比如说白天温度为25度,夜间温度为15度,具体的需根据花卉种类而定。
(3)有条件的可建立自然光照培养室,有利于小苗生长健壮生长。
二、光照
(1)光照度
植株茎尖的生长、小苗的继代增殖都需要在有光照的环境下进行,多数种类光照控制在1000-3000lx;
植株生根成苗时光照控制在300060001x范围内,在小苗移出之前逐渐增加到100001x。
(2)光谱
光谱有三种,分别为:紫外光、蓝色光、红色光。
紫外光和蓝色光能可以有效促进植物芽的分化。
红色光可以促进植物根系的形成,可在不同阶段用不同的光调控。
(3)光照时间
长日照的植物光照时间需满足于12小时以上,而短日照的植物关照时间在12小时以下。
三、湿度
特别干燥的地区或很干燥的季节,需保持室内空气相对湿度在70-80%范围内,要避免培养基失水太多,特别是培育生长期较长的木本花卉时更要注意防止培养基于燥。
四、气体
(1)无糖培养基中,二氧化碳做碳源可以有效减少了微生物污染,有利于植株更好的生长,但容器内二氧化碳不足以满足幼苗生长,所以需要人为输入;
(2)对于那些培养的植物幼体会产生乙烯的,如果在密封的瓶内则要进行处理,避免有害气体危害到植株本身。
2. 和异性出差时有过什么难忘的经历?
和异性出差时有过什么难忘的经历 ?
分享二段和异性出差的经历,一段是别人的,一段是我的亲身经历,不知大家感兴趣否。
张强大学毕业后,在一个企业就职,工作性质是搞产品推销,他每月至少有一趟出差。一个一人吃饱全家不饿的小伙,出差并没有什么不好。
单位先是安排他一个人出差,后来新来了一个年轻漂亮的女孩李娜,领导为了多推销产品,让张强带着李娜一起出差。
领导的理由很简单,现在的客户多数都是大男人,有一个如花似玉的姑娘陪在一起,生意一定会大好,性别差异毕竟是谈判桌上的润滑剂嘛!
张强没有考虑那么多,这种安排就是带新人嘛,没有什么不可以的。
不过事实证明领导的眼光是独特的,李娜的出现让张强的业绩成倍增长,这才让张强对李娜刮目相看。
李娜在校时已经处了男朋友,只是工作后两人天各一方,加之张强独特的个人魅力,使李娜怀疑自己当初是否盲目了。
几趟差出下来,张强与李娜成了单位销售的金童玉女,凡是别人不能完成的任务,交给他俩准是一个字,成。
由于每次出差张强都准备很充分,让李娜跟随有如旅游,李娜在兴奋之余,开始考虑个人问题,她在男友和张强之间游离,男友人是不错,但与一身才气的张强相比,显得稍逊一筹,距离又使李娜觉得对男友的思念是望梅止渴。
领导又安排两人去遥远的北方出差,临行前领导一再叮嘱,必须把那个客户搞定,拿下他就等于占领了半个北方市场。
到达目的地后,两人马不停蹄地赶到客户所在单位,面对对方的百般刁难,张强总是见招拆招,加上李娜满身香气的微醺,在周旋中,李娜更是把温柔一刀使用得淋漓尽致。
客户再也招架不住两面夹击,败下阵来,最终使两个人不辱使命,彻底拿下半个北方市场。
在回到酒店后,为庆祝取得的胜利,两人尽情享用了红酒,饭后意犹未尽的两人来到张强房间长谈。
在酒精的催化下,李娜迷人的脸上泛起了红云,她心中更是荡起涟漪,昵喃细语直把张强击得晕头转向。
张强对李娜一直当作工作伙伴,他心目中的那个,希望是内敛含蓄的人,象李娜这种在外抛头露脸的女人,张强从内心是拒绝的,他怕以后出事。
世上没有真正的柳下恵,在李娜的吹气如兰中,张 强开始怀疑自己是否还是自己。当李娜说出我爱你三个字时,张强强大的抵抗防线彻底崩溃。
就是一个重要的客户,让张强在出差中尝到了爱情的甜蜜,就是一顿红酒,让张强改变了自己固有的思维,就是一场饭后交谈,使张强拥有了一个强大的贤内助。
出差有太多聊不完的话题,有一见钟情,有过目不忘,有激情澎拜,有风花雪月 ,更有孽缘诞生。
凡是出过差的人,都有大堆故事,我是常年出差的人,也有自己难忘的经历。
上世纪九十年代,我与老板娘一起出差,她比我大不了几岁,是老板的二婚老婆,我虽已结婚,可婚姻生活是波澜不惊。
一路的火车上,我和老板娘同座大家都正襟危坐,到了目的地办好当天的事后,天黑了下来,我忙着安排吃饭住宿的事。
吃饭时老板娘要了一瓶红酒,我象征性地喝了一杯,余下的全归她。
席间她向我大倒苦水,说自己就是贪图老板的钱财才委身于那个老头子的 ,我劝她既然选择了就要全身心投入,不要再三心二意,她只是苦笑。
饭后我们回到酒店,老板娘约我一起去看电影,我推脱说明天有更重要的事要办 ,还是早点休息。
看到老板娘失望的表情,我不想作过多的解释,我知道若是答应的后果。
当我回到房间洗嗽完准备睡觉时,老板娘来敲门,说自己不想这么早休息,让我陪她聊一会天。
门外的老板娘本是熟透了的年纪,满身散发出诱人的气息,我让她进门后,她一下就把门关上,按下请勿打扰的灯。
我有些惧悚不安,理智提醒我,你是有家室的人,出格的事是千万不能做的。
老板娘见我一副拒人千里之外的样子,心有中以为我是伪君子。
她说:“你这人怎么还是老思想,人生能有几回醉,现在我们出门在外,何必让那些条条框框束缚自己,凡是开心就好,人生不及时行乐还有什么意义。”
我听老板娘的话说得很露骨,忙回敬她:“梁姐,老板对你不错,珍惜现在的生活吧,我们是出门在外,可我们不能因为一时的寂寞就为所欲为,传统思想有什么不好,开心存在于任何地方,没有必要固定在某一时段,人生快乐是多方面的,无论在什么时候都要保持底线,我的底线就是堂堂正正做人,我的话你懂吗。”
老板娘还不死心,她慢慢地向我靠近,一边说热,解着自己的衣扣,满身上尽是风骚媚骨,眼睛里放出勾魂的眼神,嘴里说着:“我们都是过来人,春宵一刻值千金,难道你真的不想吗?”
我忙着往后退,心里本能地拒绝着眼前的肉欲,我很清楚只要我口中应一个是字,我们将会置伦理道德不顾,做出不可描述的事。
在老板娘的步步惊心之间,我想得最多的是你千万不能干儍事,一方面老板不是吃素的,他知道后我有什么悲剧,我老婆知道后我的家庭还在吗,老板娘本是酒醉之后,当她清醒时,她会怎么做,是掩盖还是一直纠缠,要是反咬一口,我可是吃不完兜着走。
无论是何种结局,只要我迈出这一步,从前的一切都将万劫不复。
当我退到门边,自己彻底清醒,一下把门打开,老板娘眼里火热的激情瞬间消退,她无可奈何地说:“我喝多了,有些胡言乱语,你不要见笑。”
更警告我,不准将今晚的事对任何人讲。否则她是不会善罢甘休的。
我轻轻的对她说:“梁姐,你多虑了,我们只是一直在聊天,你是正派人,猪狗不如的事是禽兽干的,我们是人,不会连禽兽都不如。”
老板娘知道我话里有话,但她找不到反驳的理由,只好悻悻地离开我的房间。
我保持了一个男人的本色,在以后的出差中,还有很多故事,都是精彩却不能让人尽兴,是有些遗憾,不过行得端坐得直却是每个人终身必备的。
3. 植物组织培养实验室建设方案?
硬件:建立一个植物组织实验室和一个植物组织培养室。实验室中要有超净工作台,可以在实验室中上方设置紫外灯消毒杀菌,超净工作台前要有凳子,酒精灯,镊子,手术刀,试管架(摆放手术刀和镊子),小剪子,酒精棉,75%酒精,封口膜,培养皿或培养瓶。组织培养室要有组织培养箱,要求控制光照,温度,湿度的。根据你们实验室的规模定数量,或者可以直接用架子和灯管建立一个简易组培室(个人建议资金够得情况下买培养箱较好)
另外,还可建立一个人工气候室,模拟大自然环境,将培养好的组织培养苗移栽摆放在人工气候是培养。
软件:人工清扫,管理,植物组织培养技术,实验人员对实验材料管理和照看,如果有人工气候室,需要有电脑和控制板,来控制人工气候室的光照,温度和湿度。
器材:超净工作台,培养箱,培养架,灯管(紫外和白炽灯),酒精灯,脱脂棉,酒精,镊子,剪刀,手术刀,试管架,培养皿,培养瓶。
人力管理:设置责任制,主要管理清洁,消毒,植物组织照看过程(时刻观察是否染菌,生长情况,即使更换培养基,或者移栽),技术人员对植物组织实验的实验周期,(植物组培是一个不断重复的过程,所以需要实验人员做大量的实验才能大到效果)。
如果觉得不够直观,我可以给你几张照片看看,祝你好运!
4. 你遇见过的最豪放的人是什么样子的?
要说我见过最豪放的人,那必须是我前年遇到的一个女客户,没有之一。
时间要回溯到前年冬天腊月的中旬,当时我们已经把该收的款项都收完了,准备放假过年。
这时,我的一个关系要好的朋友发信息告诉我,在乡下的一个镇上有一户人家的别墅过了年之后就准备开始装修了,而且档次很高非常可能会需要中央空调和地暖以及新风系统。
他当即把那户人家的定位发给了我,关照我抽空记得去看一看。
我问他:“你自己有没有去过?”
他说:“我自己也没有去过,只是听别人说了一下。然后我找他要了一个定位。”
我跟他说:“不行的话,我们明天上午去一趟吧?现在年底了,老板们应该都回来过年了,说不定还能碰上房东。”
他说:“我明天早上回老家过年了。你要是不忙的话就自己先去探探路吧。”
“我忙什么?都已经准备过年了。行吧,那我就明天自己先去看看。到时候有什么情况,我们再沟通。”我说完就挂了电话。
第二天早上,我先去公司里喝了一杯茶。喝茶的时候,我抽空看了一下导航,导航显示路程为19公里,用时大约需要25分钟。
一杯茶喝完,我看了一下时间已经快到上午的九点钟了,于是就拎着包开车出发了。
路上,我也没有多想,本来我今天就是先去找找地方的。而且纯属碰碰运气,如果能遇上房东简单聊上两句当然最好,就算遇不上也没关系。毕竟现在已经年底了,就算遇上了房东,大概他也没什么心思跟我谈具体的事情。
不知不觉中,我已经到了定位显示的地方。只见朋友说的那栋别墅赫然出现在我的前方。那是一栋三层的别墅,外墙全部都是用石材干挂的。
远远的看上去,气派非凡,一看这房东就不是普通人,非富即贵。
我把车子停好之后,拎着包走了过去。别墅院子的大门虽然开着,但是我并没有直接走进去,因为很多有钱人都是非常讲究的,如果我在没有得到主人容许的情况下私自走进去,万一惹得房东不开心了,那我这单生意还没开始谈估计就要宣告结束了。
我探头从敞开的大门向里面看去,确定内装还没有开始,于是我就在站着门口等着。大概站了有十分钟左右,只见一位中年妇女从里面走了出来。她的个子不算高,我估摸着应该不到一米六,体型微胖,穿着打扮虽然很一般,但是直觉告诉我,她应该就是女房东。
我判断的理由很简单,第一别墅里没有干活的声音,证明她不是工人。第二现在已经是腊月中旬了,工人应该都已经回家过年了。第三她的衣着虽然普通,但是却一尘不染。第四我发现她手里抓着最新款的苹果手机,一般工人不会买的。正是以上四点让我断定她就是女房东。
果然,她看我拎着包站在门口,先是警惕的打量了我一眼,然后开口问道:“你找人?”
“您是房东吧?是这样的,我是咱们市区做暖通配套的供应商。我路过的时候,看到您的别墅起的这么豪华气派,就冒昧过来问一下您有没有暖通方面的需求。”说完,我递了一张名片给她。
“你怎么知道这是我的房子?”她拿着名片问道。
我把我刚才在心里想的那四点又说了一遍给她听,她听完之后脸上漏出来笑容,低头仔细的看了一下名片说:“不错,你观察的很仔细,推理的也很正确。哦,你做的品牌也还可以,正好是我需求的。我本来打算年后去市区看一下的,没想到你自己找上门了。这就是缘分。这样,你跟我到这边来一下,我把图纸拿给你看一下,你帮我配一下具体的方案。怎么样?”
“当然可以。”说完我跟着她来到隔壁的一栋房子里。
进门的时候,她很豪爽的对我说:“不用换鞋了。”
我依然笑着从包里掏出鞋套,套在了鞋上。我发现她满意的点了点头。
她给我泡了一杯绿茶,然后从书架上拿了厚厚的一沓图纸,让我先看看。
我对她说:“这样吧?能不能请您跟我一起去到房子里,我们实地看一下,然后我再根据您的需求给您配方案。”
“没问题,走吧!”她起身带着我去了新房子。
我们楼上楼下跑了几圈之后,我已经把她每个区域的作用已经需求都了解的清清楚楚了。
“你什么时候可以把方案给我?”她问。
“您大概什么时候需要?”我说。
“我当然越快越好。”她说。
“那您稍等一会,我现在就去车里拿电脑给您做方案,大概半个小时就能做好。”我说。
“那你把电脑拿过来做吧,我去给你换一杯茶。”她热情的说。
“行,您稍等。”
半个小时之后,我把方案做好了,然后又对照着图纸把详细的方案以及我的想法都和她说明了一遍,并且在征得她的同意的情况下,我还用铅笔在图纸上把每一台机器的大概位置以及管路走向都粗略的标注了出来。
最后,我按照正常折扣把大概的价格告诉了她。全套系统做下来一共是589000元。
等我这一切做完之后,已经是中午11点钟了。
我就准备起身告辞,因为她并没有还价,我猜她大概会拿着我的方案再去比较一下。谁知道这时她叫住了我,笑着对我说:“你给我一个最终成交价。”
“您可以等您老公回来之后,商量一下。价格的话,我们还可以适当的谈,但是来去已经没有那么大了。”我诚恳的对她说,毕竟这种情况我见的太多了。一开始非要追着你问最低价多少钱,等你告诉她最低价之后,她还是觉得贵,还想再便宜点。
所以,我觉得如果不是当场成交的话,谈最低价都是自欺欺人。
“不用,这种小事我老公不会过问的。我一个人就可以拿主意。你直接给我一个最低价,我今天就跟你成交。”她说的轻描淡写,我听的却是波澜壮阔。
我心想:不会吧,豪爽啊!女中豪杰啊!
我今天难道要走狗屎运了吗?一次就成交?不管怎么说,我都要试一试,反正我包里带着合同呢,这是我的习惯!
“行,那我现在去请示一下我们大区的经理。您稍等。”说完,我掏出手机拨通了我们大区经理的电话,他是陕北人,当时已经坐在回家过年的高铁上了。
他听我说完情况,在电话里对我说:“我来开电脑你把方案发给我,我现在就帮你算成本价。”听的出来,他也为我能在年底喜签大单而感到高兴。
五分钟之后,经理把最终成交价发给了我,价格是566800元。
我把经理的信息拿给她看了之后,他爽快的说:“行,拿合同签吧!定金怎么付?”
我当时简直惊呆了。虽然我让经理帮我算了价格,但是我也没有想到她真的会签,毕竟50多个W的单子呢?怎么可能说签就签呢?
“你还愣着干什么?合同呢?还有定金怎么付?”她问。
我一下子惊醒了,笑着对她说:“定金付总价的30%,我来算一下。”
“别算了,这样吧,我先付266800元,剩下30万,等设备安装调试好一次性付清。怎么样?”她说。
“不行的,设备进场的时候您还需要付第二笔款,但是您可以留5%的尾款一直到调试结束。”我说。
“哦,那算了吧,你在合同上写设备进场的时候我一次性付清货款吧。”她的豪爽又一次震惊了我。
就这样,我竟然稀里糊涂的在年前签了一年中最大的一个单子,一直到回去的路上我脑袋瓜子还是嗡嗡的。
我路上一直在想临走的时候她对我说的那几句话,她笑着说:“今天我之所以会跟你成交,是因为你有两点打动了我。第一点,你不像之前来的那些人,蒙着头就往屋里冲,我比较忌讳这种行为。第二点,也是最重要的一点,那就是你的专业。之前也来过几个业务员,他们都是拿了图纸回去找什么专业的设计师给我做方案,我就纳闷了,你都不知道我的需求,怎么能做出来最适合我的方案呢?他们回去之后,就开始一直给我打电话,让我去他们店里谈。可是我哪有时间天天往城里跑?你是第一个带着我楼上楼下了解我真正需求的人,也是我见到的第一个带着电脑能当场按照我的需求做出方案的人。就冲这两点,我把这个小工程交给你完全放心。”
写在最后:她是我见过的最豪放的女人。
但是这件事,后来我也冷静的想了。
她的豪放也是有针对性的。而不是随随便便来个人,她都会如此豪放的。
试想一下:
如果我当初一头闯进去,估计就算不被她轰出来,也不会有好结果的。
如果我也像其他人一样拿了图纸,回去之后慢慢做方案,估计也会和之前其他人的命运差不多。
就算你想快刀斩乱麻,那也得需要一定的专业来支撑。对吧?
前路漫漫,还需努力!加油!
5. 动物细胞培养过程是什么?
取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质。培养条件:
1、无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。
2、营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)。
3、血清和血浆 。(提供细胞生长必须的营养成份)4、温度和pH。(36.5±0.5℃,7.2~7.4)5、气体环境。(95%的空气+5%CO₂的混合气体)扩展资料:动物细胞有细胞核、细胞质和细胞膜,没有细胞壁,液泡不明显,含有溶酶体,动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核;它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞内部有细胞器:细胞核,双层膜,包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。内质网分为粗面的与滑面的,粗面内质网表面附有核糖体,参与蛋白质的合成和加工;光面内质网,表面没有核糖体,参与脂类合成。植物细胞与动物细胞区别:1、培养基不同:植物细胞(固体培养基),动物细胞(液体培养基)。2、培养基的成分不同:动物细胞培养必须利用动物血清,植物组织培养则不需要,而需要加入植物生长素。3、产物不同:植物组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,因此得到的是只含同一种的细胞的一个细胞系(或者叫细胞群)。
4、原理不同:植物组织培养的原理为植物细胞的全能性,动物细胞培养的原理为细胞的增殖分化。
5、过程不同:植物组织培养的过程为脱分化和再分化,动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养。
6. 组培生根培养基配方?
1/2MS+0.5mol/L NAA
(1)配制ms大量元素母液 一般将大量元素分别配制成100倍的母液,使用时再分别稀释100倍。 分别称取 nh4no3 165g kh2po4 17g kno3 190g cacl2·2h2o 44g mgso4·7h2o 37g 各自配成1l的母液。倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 (2)配制ms微量元素母液 一般将微量元素配制成100倍母液。 依次称取 ki 0.083g na2moo4·2h2o 0.025g h3bo3 0.62g cuso4·5h2o 0.0025g mnso4·h2o 1.69g cocl2·6h2o 0.0025g znso4·7h2o 0.86g 配成1l母液,倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 cuso4·5h2o和cocl2·6h2o 由于称取量很小,如果天平精确度没有达到万分之一,可先配成调整液。 分别称取 cuso4·5h2o 0.05g cocl2·6h2o 0.05g 各自配成100ml的调整液,然后取5ml就还有0.0025g的量。 (3)配制ms有机母液 一般配制成100倍ms有机母液。 依次称取 肌醇 10g 盐酸硫胺素(vb1) 0.01g 烟酸 0.05g 甘氨酸 0.2g 盐酸吡哆醇(vb6) 0.05g 配成1l母液,倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 (4)配制ms铁盐母液 一般配制成100倍ms铁盐母液。 依次称取 edta二钠 3.73g feso4·7h2o 2.78g 配成1l母液,倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 所以ms母液有5种大量元素母液,加上ms微量元素母液、ms有机母液和ms铁盐母液,共8种母液。 激素母液的配制 各种生长素和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的naoh溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。 2、配制培养基 以配置1l ms培养基为例,按顺序进行如下操作: (1)先在烧杯中放入一些蒸馏水。 (2)分别取上面八种母液10ml倒入。 (3)一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解。 (4)加蒸馏水用量筒定溶至1l。 (5)按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差。 (6)用精密试纸或酸度计调整ph至5.7-5.8。(有条件的话使用酸度计,比较精确) 可配1当量的hcl和1当量的naoh用来调溶液ph值。 1当量hcl配制:用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。 1当量naoh配制:称取naoh 4g 配成100ml溶液。 (7)称取5g左右琼脂粉(质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化。 (8)稍微冷却后,分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧。 (9)放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右。 (10)灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固。
二、灭菌
灭菌是组织培养重要的工作之一。初学者要清楚有菌和无菌的范畴。有菌的范畴是:凡是暴露在空气中的物体,接触自然水源的物体,至少它的表面都是有菌的。依此观点,无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表,如整个消化道、呼吸道,即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的。 这里所指的菌,包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其他微生物。菌的特点是:极小,肉眼看不见。无处不在,无时不有,无孔不入。在自然条件下忍耐力强,生活条件要求简单,繁殖力极强,条件适宜时便可大量滋生。 无菌的范畴是:经高温灼烧或一定时间蒸煮过后的物体,经其他物理或化学的灭菌方法处理后的物体(当然这些方法必须已经证明是有效的),高层大气、岩石内部、健康的动、植物的不与外部接触的组织内部,强酸强碱,化学元素灭菌剂等表面和内部都是无菌的。从以上可以看出:在地球表面无菌世界要比有菌世界小的多。 灭菌是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,即把所有生命的物质全部杀死。与此相关的一个概念是消毒,它指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用,显然经过消毒,许多细菌芽孢、霉菌厚垣孢子等不会完全杀死,即由于在消毒后的环境里和物品上还有活着的微生物,所以通过严格灭菌的操作空间(接种、超净台等)和使用的器皿,以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物。在这样的条件下进行的操作,就叫做无菌操作。 植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的,甚至超过微生物的培养要求,这是因为培养基含有丰富的营养,稍不小心就引起杂菌污染。要达到彻底灭菌的目的,必须根据不同的对象采取不同的切实有效的方法灭菌,才能保证培养时不受杂菌的影响,使试管苗能正常生长。 常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类,即:物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。 1、培养基用湿热灭菌 培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1mpa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 注意完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法,但目的都是要排净空气,使锅内均匀升温,保证灭菌彻底。常用方法是:关闭放气阀,通电后,待压力上升到0.05mpa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。 关阀再通电后,压力表上升达到0.1mpa时,开始计时,维持压力0.1-0.15mpa,20分钟。 按容器大小不同,保压时间有所不同,见表。该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字,如果容器体积较大,但是放置的数量很少,也可以减少时间。
三、接种
接种时由于有一个敞口的过程,所以是极易引起污染的时期,这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身引起,接种室要严格进行空间消毒。接种室内保持定期用1%-3%的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行搽洗。除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外,还可在使用期间用70%的酒精或3%的来苏儿喷雾,使空气中灰尘颗粒沉降下来。无菌操作可按以下步骤进行: (1)在接种4小时前用甲醛熏蒸接种室,并打开其内紫外线灯进行杀菌; (2)在接种前20分钟,打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯; (3)接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等; (4)上工作台后,用酒精棉球搽拭双手,特别是指甲处。然后搽拭工作台面; (5)先用酒精棉球搽拭接种工具,再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍,然后反复过火尖端处,对培养皿要过火烤干; (6)接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽等; (7)接种完毕后要清理干净工作台,可用紫外线灯灭菌30分钟,若连续接种,每5天要大强度灭菌一次。 接种是将已消毒好的根、茎、叶等离体器官,经切割或剪裁成小段或小块,放入培养基的过程。现将接种前后的程序连贯地介绍。 无菌接种步骤: (1)将初步洗涤及切割的材料放入烧杯,带入超净台上,用消毒剂灭菌,再用无菌水冲洗,最后沥去水分,取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。 (2)材料吸干后,一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀,对材料进行适当的切割。如叶片切成0.5cm平方的小块;茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片幼叶的茎尖大小等。在接种过程中要经常灼烧接种器械,防止交叉污染。 (3)用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。具体操作过程(以试管为例)是:先解开包口纸,将试管几乎水平拿着,使试管口靠近酒精灯火焰,并将管口在火焰上方转动,使管口里外灼烧数秒钟。若用棉塞盖口,可先在管口外面灼烧,去掉棉塞,再烧管口里面。然后用镊子夹取一块切好的外植体送入试管内,轻轻插入培养基上。若是叶片直接附在培养基上,以放1-3块为宜。至于材料放置方法除茎尖、茎段要正放(尖端向上)外,其他尚无统一要求。接种完后,将管口在火焰上再灼烧数秒种。并用棉塞,塞好后,包上包口纸,包口纸里面也要过火。
四、培养
培养指把培养材料放在培养室(有光照、温度条件、无菌)里,使之生长,分裂和分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程。 1、培养方法 (1)固体培养法 即用琼脂固化培养基来培养植物材料的方法。是现在最常用的方法。虽然该方法设备简单,易行,但养分分布不均,生长速度不均衡,并常有褐化中毒现象发生。 (2)液体培养法 即用不加固化剂的液体培养基培养植物材料的方法。由于液体中氧气含量较少,所以通常需要通过搅动或振动培养液的方法以确保氧气的供给,采用往复式摇床或旋转式摇床进行培养,其速度一般为50-100r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。
7. 你与陌生异性发生过特尴尬的事是什么?
一般和陌生异性发生尴尬的事情大部分会是无意的涉及到男女隐私方面的,或者是一些的表现给对方容易产生脸红的现象,导致会很丢人的感觉,下面我给大家分享一下我和陌生异性发生的一件尴尬事情:一次参加公司安排的一个安全管理学习,学习的地方是第三方承包的一所培训中心,一般去学习的都是第一次去那个地方,开始学习了几天,对地形稍微有点熟悉了,刚开始去的时候愣是没找着男洗手间,但是有一个洗手间上面公共厕所,而写还贴着一张手写的大白纸,上面写的"女厕",我比较懵,到底是公共还是女厕呢?我就在门口站着等,看看有没有进去或出来的,不一会我看到两个男的边聊天边走,很自然的进去了,应该是公共厕所吧,然后我也进去了,果然是男厕所,因为里面有小便器;
下午将要开课的时候,我又去洗手间了,正在小便的时候,听见有人敲门,我也没理会,我继续方便,突然门开了,进来了一位女士,正好我是背对她,她也没出去,就站在那里说:这不是女厕所吗?上面写着女厕啊,我说是男厕吧,他们都来这里呢,我的脸当时就发热了,心想,看见我站着里小便呢,她怎么也不出去说话,这女的够开放的,听我说完是男厕后她才出去了,等我出去的时候,四目相对,我都不好意思了,那女士还找我问话呢,一点没觉得尴尬,你看这门口写的"女厕"啊,我说这里面有小便器,应该是男厕,要不就是女厕坏了,临时当公共厕所了吧,那女士"哦"了一声,走了,可能是去别的地方找洗手间了吧,这下弄得我很尴尬,很不好意思,不过那女士一点羞涩都没有,不亏是过来人呐,比男的脸皮还厚。
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1. 组织培养瓶,组织培养育苗时环境条件怎样调控?
【花卉组织培养育苗环境条件的调控措施】花卉组织培养育苗环境条件的调控措施主要有温度、关照、湿度及气体四大方面,在进行组织培养育苗时,需重点关注这四点。下面是详细介绍,一起来看看吧!
一、温度
(1)培养原产热带的植物温度需肯控制在26-27度范围内,在冷凉地区植物温度需肯控制在20-23度,温度一般控制在23-27度能适应绝大多数的植物生长。
(2)夜间比白天低几度,比如说白天温度为25度,夜间温度为15度,具体的需根据花卉种类而定。
(3)有条件的可建立自然光照培养室,有利于小苗生长健壮生长。
二、光照
(1)光照度
植株茎尖的生长、小苗的继代增殖都需要在有光照的环境下进行,多数种类光照控制在1000-3000lx;
植株生根成苗时光照控制在300060001x范围内,在小苗移出之前逐渐增加到100001x。
(2)光谱
光谱有三种,分别为:紫外光、蓝色光、红色光。
紫外光和蓝色光能可以有效促进植物芽的分化。
红色光可以促进植物根系的形成,可在不同阶段用不同的光调控。
(3)光照时间
长日照的植物光照时间需满足于12小时以上,而短日照的植物关照时间在12小时以下。
三、湿度
特别干燥的地区或很干燥的季节,需保持室内空气相对湿度在70-80%范围内,要避免培养基失水太多,特别是培育生长期较长的木本花卉时更要注意防止培养基于燥。
四、气体
(1)无糖培养基中,二氧化碳做碳源可以有效减少了微生物污染,有利于植株更好的生长,但容器内二氧化碳不足以满足幼苗生长,所以需要人为输入;
(2)对于那些培养的植物幼体会产生乙烯的,如果在密封的瓶内则要进行处理,避免有害气体危害到植株本身。
2. 和异性出差时有过什么难忘的经历?
和异性出差时有过什么难忘的经历 ?
分享二段和异性出差的经历,一段是别人的,一段是我的亲身经历,不知大家感兴趣否。
张强大学毕业后,在一个企业就职,工作性质是搞产品推销,他每月至少有一趟出差。一个一人吃饱全家不饿的小伙,出差并没有什么不好。
单位先是安排他一个人出差,后来新来了一个年轻漂亮的女孩李娜,领导为了多推销产品,让张强带着李娜一起出差。
领导的理由很简单,现在的客户多数都是大男人,有一个如花似玉的姑娘陪在一起,生意一定会大好,性别差异毕竟是谈判桌上的润滑剂嘛!
张强没有考虑那么多,这种安排就是带新人嘛,没有什么不可以的。
不过事实证明领导的眼光是独特的,李娜的出现让张强的业绩成倍增长,这才让张强对李娜刮目相看。
李娜在校时已经处了男朋友,只是工作后两人天各一方,加之张强独特的个人魅力,使李娜怀疑自己当初是否盲目了。
几趟差出下来,张强与李娜成了单位销售的金童玉女,凡是别人不能完成的任务,交给他俩准是一个字,成。
由于每次出差张强都准备很充分,让李娜跟随有如旅游,李娜在兴奋之余,开始考虑个人问题,她在男友和张强之间游离,男友人是不错,但与一身才气的张强相比,显得稍逊一筹,距离又使李娜觉得对男友的思念是望梅止渴。
领导又安排两人去遥远的北方出差,临行前领导一再叮嘱,必须把那个客户搞定,拿下他就等于占领了半个北方市场。
到达目的地后,两人马不停蹄地赶到客户所在单位,面对对方的百般刁难,张强总是见招拆招,加上李娜满身香气的微醺,在周旋中,李娜更是把温柔一刀使用得淋漓尽致。
客户再也招架不住两面夹击,败下阵来,最终使两个人不辱使命,彻底拿下半个北方市场。
在回到酒店后,为庆祝取得的胜利,两人尽情享用了红酒,饭后意犹未尽的两人来到张强房间长谈。
在酒精的催化下,李娜迷人的脸上泛起了红云,她心中更是荡起涟漪,昵喃细语直把张强击得晕头转向。
张强对李娜一直当作工作伙伴,他心目中的那个,希望是内敛含蓄的人,象李娜这种在外抛头露脸的女人,张强从内心是拒绝的,他怕以后出事。
世上没有真正的柳下恵,在李娜的吹气如兰中,张 强开始怀疑自己是否还是自己。当李娜说出我爱你三个字时,张强强大的抵抗防线彻底崩溃。
就是一个重要的客户,让张强在出差中尝到了爱情的甜蜜,就是一顿红酒,让张强改变了自己固有的思维,就是一场饭后交谈,使张强拥有了一个强大的贤内助。
出差有太多聊不完的话题,有一见钟情,有过目不忘,有激情澎拜,有风花雪月 ,更有孽缘诞生。
凡是出过差的人,都有大堆故事,我是常年出差的人,也有自己难忘的经历。
上世纪九十年代,我与老板娘一起出差,她比我大不了几岁,是老板的二婚老婆,我虽已结婚,可婚姻生活是波澜不惊。
一路的火车上,我和老板娘同座大家都正襟危坐,到了目的地办好当天的事后,天黑了下来,我忙着安排吃饭住宿的事。
吃饭时老板娘要了一瓶红酒,我象征性地喝了一杯,余下的全归她。
席间她向我大倒苦水,说自己就是贪图老板的钱财才委身于那个老头子的 ,我劝她既然选择了就要全身心投入,不要再三心二意,她只是苦笑。
饭后我们回到酒店,老板娘约我一起去看电影,我推脱说明天有更重要的事要办 ,还是早点休息。
看到老板娘失望的表情,我不想作过多的解释,我知道若是答应的后果。
当我回到房间洗嗽完准备睡觉时,老板娘来敲门,说自己不想这么早休息,让我陪她聊一会天。
门外的老板娘本是熟透了的年纪,满身散发出诱人的气息,我让她进门后,她一下就把门关上,按下请勿打扰的灯。
我有些惧悚不安,理智提醒我,你是有家室的人,出格的事是千万不能做的。
老板娘见我一副拒人千里之外的样子,心有中以为我是伪君子。
她说:“你这人怎么还是老思想,人生能有几回醉,现在我们出门在外,何必让那些条条框框束缚自己,凡是开心就好,人生不及时行乐还有什么意义。”
我听老板娘的话说得很露骨,忙回敬她:“梁姐,老板对你不错,珍惜现在的生活吧,我们是出门在外,可我们不能因为一时的寂寞就为所欲为,传统思想有什么不好,开心存在于任何地方,没有必要固定在某一时段,人生快乐是多方面的,无论在什么时候都要保持底线,我的底线就是堂堂正正做人,我的话你懂吗。”
老板娘还不死心,她慢慢地向我靠近,一边说热,解着自己的衣扣,满身上尽是风骚媚骨,眼睛里放出勾魂的眼神,嘴里说着:“我们都是过来人,春宵一刻值千金,难道你真的不想吗?”
我忙着往后退,心里本能地拒绝着眼前的肉欲,我很清楚只要我口中应一个是字,我们将会置伦理道德不顾,做出不可描述的事。
在老板娘的步步惊心之间,我想得最多的是你千万不能干儍事,一方面老板不是吃素的,他知道后我有什么悲剧,我老婆知道后我的家庭还在吗,老板娘本是酒醉之后,当她清醒时,她会怎么做,是掩盖还是一直纠缠,要是反咬一口,我可是吃不完兜着走。
无论是何种结局,只要我迈出这一步,从前的一切都将万劫不复。
当我退到门边,自己彻底清醒,一下把门打开,老板娘眼里火热的激情瞬间消退,她无可奈何地说:“我喝多了,有些胡言乱语,你不要见笑。”
更警告我,不准将今晚的事对任何人讲。否则她是不会善罢甘休的。
我轻轻的对她说:“梁姐,你多虑了,我们只是一直在聊天,你是正派人,猪狗不如的事是禽兽干的,我们是人,不会连禽兽都不如。”
老板娘知道我话里有话,但她找不到反驳的理由,只好悻悻地离开我的房间。
我保持了一个男人的本色,在以后的出差中,还有很多故事,都是精彩却不能让人尽兴,是有些遗憾,不过行得端坐得直却是每个人终身必备的。
3. 植物组织培养实验室建设方案?
硬件:建立一个植物组织实验室和一个植物组织培养室。实验室中要有超净工作台,可以在实验室中上方设置紫外灯消毒杀菌,超净工作台前要有凳子,酒精灯,镊子,手术刀,试管架(摆放手术刀和镊子),小剪子,酒精棉,75%酒精,封口膜,培养皿或培养瓶。组织培养室要有组织培养箱,要求控制光照,温度,湿度的。根据你们实验室的规模定数量,或者可以直接用架子和灯管建立一个简易组培室(个人建议资金够得情况下买培养箱较好)
另外,还可建立一个人工气候室,模拟大自然环境,将培养好的组织培养苗移栽摆放在人工气候是培养。
软件:人工清扫,管理,植物组织培养技术,实验人员对实验材料管理和照看,如果有人工气候室,需要有电脑和控制板,来控制人工气候室的光照,温度和湿度。
器材:超净工作台,培养箱,培养架,灯管(紫外和白炽灯),酒精灯,脱脂棉,酒精,镊子,剪刀,手术刀,试管架,培养皿,培养瓶。
人力管理:设置责任制,主要管理清洁,消毒,植物组织照看过程(时刻观察是否染菌,生长情况,即使更换培养基,或者移栽),技术人员对植物组织实验的实验周期,(植物组培是一个不断重复的过程,所以需要实验人员做大量的实验才能大到效果)。
如果觉得不够直观,我可以给你几张照片看看,祝你好运!
4. 你遇见过的最豪放的人是什么样子的?
要说我见过最豪放的人,那必须是我前年遇到的一个女客户,没有之一。
时间要回溯到前年冬天腊月的中旬,当时我们已经把该收的款项都收完了,准备放假过年。
这时,我的一个关系要好的朋友发信息告诉我,在乡下的一个镇上有一户人家的别墅过了年之后就准备开始装修了,而且档次很高非常可能会需要中央空调和地暖以及新风系统。
他当即把那户人家的定位发给了我,关照我抽空记得去看一看。
我问他:“你自己有没有去过?”
他说:“我自己也没有去过,只是听别人说了一下。然后我找他要了一个定位。”
我跟他说:“不行的话,我们明天上午去一趟吧?现在年底了,老板们应该都回来过年了,说不定还能碰上房东。”
他说:“我明天早上回老家过年了。你要是不忙的话就自己先去探探路吧。”
“我忙什么?都已经准备过年了。行吧,那我就明天自己先去看看。到时候有什么情况,我们再沟通。”我说完就挂了电话。
第二天早上,我先去公司里喝了一杯茶。喝茶的时候,我抽空看了一下导航,导航显示路程为19公里,用时大约需要25分钟。
一杯茶喝完,我看了一下时间已经快到上午的九点钟了,于是就拎着包开车出发了。
路上,我也没有多想,本来我今天就是先去找找地方的。而且纯属碰碰运气,如果能遇上房东简单聊上两句当然最好,就算遇不上也没关系。毕竟现在已经年底了,就算遇上了房东,大概他也没什么心思跟我谈具体的事情。
不知不觉中,我已经到了定位显示的地方。只见朋友说的那栋别墅赫然出现在我的前方。那是一栋三层的别墅,外墙全部都是用石材干挂的。
远远的看上去,气派非凡,一看这房东就不是普通人,非富即贵。
我把车子停好之后,拎着包走了过去。别墅院子的大门虽然开着,但是我并没有直接走进去,因为很多有钱人都是非常讲究的,如果我在没有得到主人容许的情况下私自走进去,万一惹得房东不开心了,那我这单生意还没开始谈估计就要宣告结束了。
我探头从敞开的大门向里面看去,确定内装还没有开始,于是我就在站着门口等着。大概站了有十分钟左右,只见一位中年妇女从里面走了出来。她的个子不算高,我估摸着应该不到一米六,体型微胖,穿着打扮虽然很一般,但是直觉告诉我,她应该就是女房东。
我判断的理由很简单,第一别墅里没有干活的声音,证明她不是工人。第二现在已经是腊月中旬了,工人应该都已经回家过年了。第三她的衣着虽然普通,但是却一尘不染。第四我发现她手里抓着最新款的苹果手机,一般工人不会买的。正是以上四点让我断定她就是女房东。
果然,她看我拎着包站在门口,先是警惕的打量了我一眼,然后开口问道:“你找人?”
“您是房东吧?是这样的,我是咱们市区做暖通配套的供应商。我路过的时候,看到您的别墅起的这么豪华气派,就冒昧过来问一下您有没有暖通方面的需求。”说完,我递了一张名片给她。
“你怎么知道这是我的房子?”她拿着名片问道。
我把我刚才在心里想的那四点又说了一遍给她听,她听完之后脸上漏出来笑容,低头仔细的看了一下名片说:“不错,你观察的很仔细,推理的也很正确。哦,你做的品牌也还可以,正好是我需求的。我本来打算年后去市区看一下的,没想到你自己找上门了。这就是缘分。这样,你跟我到这边来一下,我把图纸拿给你看一下,你帮我配一下具体的方案。怎么样?”
“当然可以。”说完我跟着她来到隔壁的一栋房子里。
进门的时候,她很豪爽的对我说:“不用换鞋了。”
我依然笑着从包里掏出鞋套,套在了鞋上。我发现她满意的点了点头。
她给我泡了一杯绿茶,然后从书架上拿了厚厚的一沓图纸,让我先看看。
我对她说:“这样吧?能不能请您跟我一起去到房子里,我们实地看一下,然后我再根据您的需求给您配方案。”
“没问题,走吧!”她起身带着我去了新房子。
我们楼上楼下跑了几圈之后,我已经把她每个区域的作用已经需求都了解的清清楚楚了。
“你什么时候可以把方案给我?”她问。
“您大概什么时候需要?”我说。
“我当然越快越好。”她说。
“那您稍等一会,我现在就去车里拿电脑给您做方案,大概半个小时就能做好。”我说。
“那你把电脑拿过来做吧,我去给你换一杯茶。”她热情的说。
“行,您稍等。”
半个小时之后,我把方案做好了,然后又对照着图纸把详细的方案以及我的想法都和她说明了一遍,并且在征得她的同意的情况下,我还用铅笔在图纸上把每一台机器的大概位置以及管路走向都粗略的标注了出来。
最后,我按照正常折扣把大概的价格告诉了她。全套系统做下来一共是589000元。
等我这一切做完之后,已经是中午11点钟了。
我就准备起身告辞,因为她并没有还价,我猜她大概会拿着我的方案再去比较一下。谁知道这时她叫住了我,笑着对我说:“你给我一个最终成交价。”
“您可以等您老公回来之后,商量一下。价格的话,我们还可以适当的谈,但是来去已经没有那么大了。”我诚恳的对她说,毕竟这种情况我见的太多了。一开始非要追着你问最低价多少钱,等你告诉她最低价之后,她还是觉得贵,还想再便宜点。
所以,我觉得如果不是当场成交的话,谈最低价都是自欺欺人。
“不用,这种小事我老公不会过问的。我一个人就可以拿主意。你直接给我一个最低价,我今天就跟你成交。”她说的轻描淡写,我听的却是波澜壮阔。
我心想:不会吧,豪爽啊!女中豪杰啊!
我今天难道要走狗屎运了吗?一次就成交?不管怎么说,我都要试一试,反正我包里带着合同呢,这是我的习惯!
“行,那我现在去请示一下我们大区的经理。您稍等。”说完,我掏出手机拨通了我们大区经理的电话,他是陕北人,当时已经坐在回家过年的高铁上了。
他听我说完情况,在电话里对我说:“我来开电脑你把方案发给我,我现在就帮你算成本价。”听的出来,他也为我能在年底喜签大单而感到高兴。
五分钟之后,经理把最终成交价发给了我,价格是566800元。
我把经理的信息拿给她看了之后,他爽快的说:“行,拿合同签吧!定金怎么付?”
我当时简直惊呆了。虽然我让经理帮我算了价格,但是我也没有想到她真的会签,毕竟50多个W的单子呢?怎么可能说签就签呢?
“你还愣着干什么?合同呢?还有定金怎么付?”她问。
我一下子惊醒了,笑着对她说:“定金付总价的30%,我来算一下。”
“别算了,这样吧,我先付266800元,剩下30万,等设备安装调试好一次性付清。怎么样?”她说。
“不行的,设备进场的时候您还需要付第二笔款,但是您可以留5%的尾款一直到调试结束。”我说。
“哦,那算了吧,你在合同上写设备进场的时候我一次性付清货款吧。”她的豪爽又一次震惊了我。
就这样,我竟然稀里糊涂的在年前签了一年中最大的一个单子,一直到回去的路上我脑袋瓜子还是嗡嗡的。
我路上一直在想临走的时候她对我说的那几句话,她笑着说:“今天我之所以会跟你成交,是因为你有两点打动了我。第一点,你不像之前来的那些人,蒙着头就往屋里冲,我比较忌讳这种行为。第二点,也是最重要的一点,那就是你的专业。之前也来过几个业务员,他们都是拿了图纸回去找什么专业的设计师给我做方案,我就纳闷了,你都不知道我的需求,怎么能做出来最适合我的方案呢?他们回去之后,就开始一直给我打电话,让我去他们店里谈。可是我哪有时间天天往城里跑?你是第一个带着我楼上楼下了解我真正需求的人,也是我见到的第一个带着电脑能当场按照我的需求做出方案的人。就冲这两点,我把这个小工程交给你完全放心。”
写在最后:她是我见过的最豪放的女人。
但是这件事,后来我也冷静的想了。
她的豪放也是有针对性的。而不是随随便便来个人,她都会如此豪放的。
试想一下:
如果我当初一头闯进去,估计就算不被她轰出来,也不会有好结果的。
如果我也像其他人一样拿了图纸,回去之后慢慢做方案,估计也会和之前其他人的命运差不多。
就算你想快刀斩乱麻,那也得需要一定的专业来支撑。对吧?
前路漫漫,还需努力!加油!
5. 动物细胞培养过程是什么?
取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质。培养条件:
1、无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。
2、营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)。
3、血清和血浆 。(提供细胞生长必须的营养成份)4、温度和pH。(36.5±0.5℃,7.2~7.4)5、气体环境。(95%的空气+5%CO₂的混合气体)扩展资料:动物细胞有细胞核、细胞质和细胞膜,没有细胞壁,液泡不明显,含有溶酶体,动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核;它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞内部有细胞器:细胞核,双层膜,包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。内质网分为粗面的与滑面的,粗面内质网表面附有核糖体,参与蛋白质的合成和加工;光面内质网,表面没有核糖体,参与脂类合成。植物细胞与动物细胞区别:1、培养基不同:植物细胞(固体培养基),动物细胞(液体培养基)。2、培养基的成分不同:动物细胞培养必须利用动物血清,植物组织培养则不需要,而需要加入植物生长素。3、产物不同:植物组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,因此得到的是只含同一种的细胞的一个细胞系(或者叫细胞群)。
4、原理不同:植物组织培养的原理为植物细胞的全能性,动物细胞培养的原理为细胞的增殖分化。
5、过程不同:植物组织培养的过程为脱分化和再分化,动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养。
6. 组培生根培养基配方?
1/2MS+0.5mol/L NAA
(1)配制ms大量元素母液 一般将大量元素分别配制成100倍的母液,使用时再分别稀释100倍。 分别称取 nh4no3 165g kh2po4 17g kno3 190g cacl2·2h2o 44g mgso4·7h2o 37g 各自配成1l的母液。倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 (2)配制ms微量元素母液 一般将微量元素配制成100倍母液。 依次称取 ki 0.083g na2moo4·2h2o 0.025g h3bo3 0.62g cuso4·5h2o 0.0025g mnso4·h2o 1.69g cocl2·6h2o 0.0025g znso4·7h2o 0.86g 配成1l母液,倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 cuso4·5h2o和cocl2·6h2o 由于称取量很小,如果天平精确度没有达到万分之一,可先配成调整液。 分别称取 cuso4·5h2o 0.05g cocl2·6h2o 0.05g 各自配成100ml的调整液,然后取5ml就还有0.0025g的量。 (3)配制ms有机母液 一般配制成100倍ms有机母液。 依次称取 肌醇 10g 盐酸硫胺素(vb1) 0.01g 烟酸 0.05g 甘氨酸 0.2g 盐酸吡哆醇(vb6) 0.05g 配成1l母液,倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 (4)配制ms铁盐母液 一般配制成100倍ms铁盐母液。 依次称取 edta二钠 3.73g feso4·7h2o 2.78g 配成1l母液,倒入1l试剂瓶中,存放于冰箱中。 所以ms母液有5种大量元素母液,加上ms微量元素母液、ms有机母液和ms铁盐母液,共8种母液。 激素母液的配制 各种生长素和细胞分裂素要单独配制,不能混合在一起,生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的naoh溶解,细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解,然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。 2、配制培养基 以配置1l ms培养基为例,按顺序进行如下操作: (1)先在烧杯中放入一些蒸馏水。 (2)分别取上面八种母液10ml倒入。 (3)一般称取30g蔗糖倒入,搅拌溶解。 (4)加蒸馏水用量筒定溶至1l。 (5)按设计好的方案添加各种激素,由于激素的用量很小,而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取,减少误差。 (6)用精密试纸或酸度计调整ph至5.7-5.8。(有条件的话使用酸度计,比较精确) 可配1当量的hcl和1当量的naoh用来调溶液ph值。 1当量hcl配制:用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。 1当量naoh配制:称取naoh 4g 配成100ml溶液。 (7)称取5g左右琼脂粉(质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热至沸腾,直到琼脂粉熔化。 (8)稍微冷却后,分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口,用橡皮筋或绳子扎紧。 (9)放入消毒灭菌锅灭菌,灭菌20分钟左右。 (10)灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固。
二、灭菌
灭菌是组织培养重要的工作之一。初学者要清楚有菌和无菌的范畴。有菌的范畴是:凡是暴露在空气中的物体,接触自然水源的物体,至少它的表面都是有菌的。依此观点,无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表,如整个消化道、呼吸道,即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的。 这里所指的菌,包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其他微生物。菌的特点是:极小,肉眼看不见。无处不在,无时不有,无孔不入。在自然条件下忍耐力强,生活条件要求简单,繁殖力极强,条件适宜时便可大量滋生。 无菌的范畴是:经高温灼烧或一定时间蒸煮过后的物体,经其他物理或化学的灭菌方法处理后的物体(当然这些方法必须已经证明是有效的),高层大气、岩石内部、健康的动、植物的不与外部接触的组织内部,强酸强碱,化学元素灭菌剂等表面和内部都是无菌的。从以上可以看出:在地球表面无菌世界要比有菌世界小的多。 灭菌是指用物理或化学的方法,杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体,即把所有生命的物质全部杀死。与此相关的一个概念是消毒,它指杀死、消除或充分抑制部分微生物,使之不再发生危害作用,显然经过消毒,许多细菌芽孢、霉菌厚垣孢子等不会完全杀死,即由于在消毒后的环境里和物品上还有活着的微生物,所以通过严格灭菌的操作空间(接种、超净台等)和使用的器皿,以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物。在这样的条件下进行的操作,就叫做无菌操作。 植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的,甚至超过微生物的培养要求,这是因为培养基含有丰富的营养,稍不小心就引起杂菌污染。要达到彻底灭菌的目的,必须根据不同的对象采取不同的切实有效的方法灭菌,才能保证培养时不受杂菌的影响,使试管苗能正常生长。 常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类,即:物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。 1、培养基用湿热灭菌 培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序。高压灭菌的原理是:在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1mpa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。 注意完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法,但目的都是要排净空气,使锅内均匀升温,保证灭菌彻底。常用方法是:关闭放气阀,通电后,待压力上升到0.05mpa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。 关阀再通电后,压力表上升达到0.1mpa时,开始计时,维持压力0.1-0.15mpa,20分钟。 按容器大小不同,保压时间有所不同,见表。该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字,如果容器体积较大,但是放置的数量很少,也可以减少时间。
三、接种
接种时由于有一个敞口的过程,所以是极易引起污染的时期,这一时期主要由空气中的细菌和工作人员本身引起,接种室要严格进行空间消毒。接种室内保持定期用1%-3%的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行搽洗。除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外,还可在使用期间用70%的酒精或3%的来苏儿喷雾,使空气中灰尘颗粒沉降下来。无菌操作可按以下步骤进行: (1)在接种4小时前用甲醛熏蒸接种室,并打开其内紫外线灯进行杀菌; (2)在接种前20分钟,打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯; (3)接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等; (4)上工作台后,用酒精棉球搽拭双手,特别是指甲处。然后搽拭工作台面; (5)先用酒精棉球搽拭接种工具,再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍,然后反复过火尖端处,对培养皿要过火烤干; (6)接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽等; (7)接种完毕后要清理干净工作台,可用紫外线灯灭菌30分钟,若连续接种,每5天要大强度灭菌一次。 接种是将已消毒好的根、茎、叶等离体器官,经切割或剪裁成小段或小块,放入培养基的过程。现将接种前后的程序连贯地介绍。 无菌接种步骤: (1)将初步洗涤及切割的材料放入烧杯,带入超净台上,用消毒剂灭菌,再用无菌水冲洗,最后沥去水分,取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。 (2)材料吸干后,一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀,对材料进行适当的切割。如叶片切成0.5cm平方的小块;茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片幼叶的茎尖大小等。在接种过程中要经常灼烧接种器械,防止交叉污染。 (3)用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。具体操作过程(以试管为例)是:先解开包口纸,将试管几乎水平拿着,使试管口靠近酒精灯火焰,并将管口在火焰上方转动,使管口里外灼烧数秒钟。若用棉塞盖口,可先在管口外面灼烧,去掉棉塞,再烧管口里面。然后用镊子夹取一块切好的外植体送入试管内,轻轻插入培养基上。若是叶片直接附在培养基上,以放1-3块为宜。至于材料放置方法除茎尖、茎段要正放(尖端向上)外,其他尚无统一要求。接种完后,将管口在火焰上再灼烧数秒种。并用棉塞,塞好后,包上包口纸,包口纸里面也要过火。
四、培养
培养指把培养材料放在培养室(有光照、温度条件、无菌)里,使之生长,分裂和分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程。 1、培养方法 (1)固体培养法 即用琼脂固化培养基来培养植物材料的方法。是现在最常用的方法。虽然该方法设备简单,易行,但养分分布不均,生长速度不均衡,并常有褐化中毒现象发生。 (2)液体培养法 即用不加固化剂的液体培养基培养植物材料的方法。由于液体中氧气含量较少,所以通常需要通过搅动或振动培养液的方法以确保氧气的供给,采用往复式摇床或旋转式摇床进行培养,其速度一般为50-100r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。
7. 你与陌生异性发生过特尴尬的事是什么?
一般和陌生异性发生尴尬的事情大部分会是无意的涉及到男女隐私方面的,或者是一些的表现给对方容易产生脸红的现象,导致会很丢人的感觉,下面我给大家分享一下我和陌生异性发生的一件尴尬事情:一次参加公司安排的一个安全管理学习,学习的地方是第三方承包的一所培训中心,一般去学习的都是第一次去那个地方,开始学习了几天,对地形稍微有点熟悉了,刚开始去的时候愣是没找着男洗手间,但是有一个洗手间上面公共厕所,而写还贴着一张手写的大白纸,上面写的"女厕",我比较懵,到底是公共还是女厕呢?我就在门口站着等,看看有没有进去或出来的,不一会我看到两个男的边聊天边走,很自然的进去了,应该是公共厕所吧,然后我也进去了,果然是男厕所,因为里面有小便器;
下午将要开课的时候,我又去洗手间了,正在小便的时候,听见有人敲门,我也没理会,我继续方便,突然门开了,进来了一位女士,正好我是背对她,她也没出去,就站在那里说:这不是女厕所吗?上面写着女厕啊,我说是男厕吧,他们都来这里呢,我的脸当时就发热了,心想,看见我站着里小便呢,她怎么也不出去说话,这女的够开放的,听我说完是男厕后她才出去了,等我出去的时候,四目相对,我都不好意思了,那女士还找我问话呢,一点没觉得尴尬,你看这门口写的"女厕"啊,我说这里面有小便器,应该是男厕,要不就是女厕坏了,临时当公共厕所了吧,那女士"哦"了一声,走了,可能是去别的地方找洗手间了吧,这下弄得我很尴尬,很不好意思,不过那女士一点羞涩都没有,不亏是过来人呐,比男的脸皮还厚。
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